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技術文章
更新時間：2021-08-23
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那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關于電泳帶型分析：
DNA電泳需要進行帶型分析，在實驗過程中常會發現所得的帶型出現在這樣那樣的問題。在此，我們對DNA帶型做了相應的分析。
| 帶型 | 原因分析 | 解決辦法 |
| 弱帶或無帶 | 上樣的DNA量不夠 | 增加DNA的上樣量，聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高 |
| DNA降解 | 避免DNA的核酸酶污染 | |
| 電泳時間過長，DNA跑出 | 減短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度 | |
| EB染色的DNA，紫外光源不合適 | 應用短波長（254nm），增強紫外燈靈敏度 | |
| DNA帶缺失 | 小DNA帶走出凝膠 | 減短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度 |
| 分子大小相近的DNA帶不易分辨 | 增加電泳時間，核準正確的凝膠濃度 | |
| DNA 變性 | 電泳前請勿高溫加熱DNA鏈，以20mM NaCl Buffer稀釋DNA | |
| 巨大DNA鏈，凝膠電泳不合適 | 在脈沖凝膠電泳上分析 | |
| DNA帶模糊 | DNA降解 | 避免核酸酶污染 |
| DNA上樣量過多 | 減少凝膠中DNA上樣量 | |
| 所用電泳條件不合適 | 電泳時電壓不應超過20V/cm，溫度＜30℃,巨大DNA鏈，溫度應＜15℃，核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力 | |
| DNA樣含鹽過高 | 電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽 | |
| 有蛋白污染 | 電泳前酚抽提去除蛋白 | |
| DNA變性 | 電泳前勿加熱，用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA | |
| 不規則DNA帶遷移 | 對于λ/Hind III片段COS位點復性 | 電泳前加熱DNA 65℃加熱5-10分鐘，然后在冰上冷卻5分鐘 |
| 電泳條件不合適 | 電泳電壓不超過20V/cm，溫度＜30℃，電泳緩沖液有足夠的緩沖能力 | |
| DNA變性 | 以20mM NaCl Buffer稀釋DNA，電泳前勿加熱 |
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關于電泳帶型分析。
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